超高速離心機(jī)分離方法
一：差速離心：
逐次增加離心力，每次可沉降樣品溶液中的一些組份。 差速離心是一種最常用的方法。在這種方法中，離心管在開始時(shí)裝滿了均一的樣品溶液。
通過在一定速度下一定時(shí)間的離心后，就可得到兩個(gè)部份：沉淀和上清液。 通常在第一次離心時(shí)把大部分不需要的大粒子沉降去掉。這時(shí)所需的組份大部分仍留在上清液中，然后將收集到的上清液以更高速度離心，把所需的粒子沉積下來。離心的時(shí)間要選擇得當(dāng)，使大部份不需要的更小的粒子仍留在上清液中。
對于得到的沉淀和上清液可以進(jìn)行進(jìn)一步的離心，直到達(dá)到所需要的分離純度為止。 差速離心的特點(diǎn)是操作簡單，但分離純度不高。
二：密度梯度離心法：
可以同時(shí)使樣品中幾個(gè)或全部組份分離，具有很好的分辨率。
(1)速率區(qū)帶法： 根據(jù)樣品中不同粒子所具有的不同的尺寸大小及沉降速度(S)。大致步驟如下： 在離心管中裝入密度梯度溶液，溶液的密度從離心管頂部至底部逐漸增加(正梯度)。 將所需分離的樣品小心地加至密度梯度溶液的頂部。樣品在梯度溶液表面形成一負(fù)梯度。 由于不同大小的粒子在離心力作用下，在梯度中移動的速度不一樣，所以經(jīng)過離心后會形成幾條分開的樣品區(qū)帶。 注意：樣品粒子的密度必須大于梯度液注中任一點(diǎn)的密度。離心過程必須在區(qū)帶到達(dá)管子底部前停止。
(2)等密度離心法： 根據(jù)粒子的不同密度來分離。離心過程中，粒子會移至與它本身密度相同的地方形成區(qū)帶。 密度樣度的選擇要使梯度的范圍包括所有待分離粒子的密度。樣品可以在密度梯度液粒上面或均勻分布在密度梯度中，經(jīng)離心后，樣品粒子達(dá)到它們的平衡點(diǎn)。
注意：平衡后粒子的分離完全由其密度決定，與時(shí)間無關(guān)，此時(shí)再改變離心轉(zhuǎn)速，只能改變區(qū)帶的相對位置。
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